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vector nti 11 使用教程 附录A:如何取得序列

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附录A:如何取得欲分析之序列

附录A 如何取得欲分析之序列

透过网络抓取序列范例:

首先,我们可以先进入NCBI 网站( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) (图A.1),在首页 “Search”下拉式选单及“for”文字盒中选择及输入适当选项内容,例如 Search Nucleotide ; for  cyp1A,然后按下”Go ”按钮进行搜寻。

A.1 NCBI 网站

此时 NCBI会传回如下之画面,目前 NCBI Nucleotide database 已经分成三个数据库,适当选择所需内容,点选所显示之数字进入适当数据库并进行下一步选择。三个数据库分别为

CoreNucleotide contains all Nucleotide records that are not in EST or GSS. They are of interest to most users.

EST contains only Expressed Sequence Tag records.  GSS contains only Genome Survey Sequence records.

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A.2 CoreNucleotide数据库

例如点选图A.2中 “81 CoreNucleotide” 之选项,可以进入更细部的选择,在CoreNucleotide数据库中总共含有81笔相关记录(图A.3),可依使用者所需进行点选,于此我们选择斑马鱼 (zebrafish Danio rerio) 为范例进行说明,所以将点选第4笔数据 NM_131879 (Danio rerio cytochrome P450, family 1, subfamily A (cyp1a), mRNA)并得到如下图A.4:

A.3 得到81笔斑马鱼的相关数据

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附录A:如何取得欲分析之序列

A.4 点选NM_131879得到的结果

可以在左上角“Display”下拉式选单中选取“FASTA”,并得到以下仅含序列内容的画面信息(A.5)。

A.5 NM_131879FASTA格式的数据

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确定为所需之序列内容后,在“Display”下拉式选单右边 “Send to” 的下拉式选单选取“File”,此时系统将启动档案下载对话窗口,按下“储存”进行档案(FASTA格式)下载。

A.6 下拉式选单,选择File,进行储存

定序序列分析范例:

实验结果送交定序完成后,我们会从定序的公司收到两个档案(图A.7): 一个是序列的文本文件(如.seq之类),另一个是雷射图谱的档案(.abI)。这两个档案需要特定的软件才能开启,如果没有相关的软件,我们可以由下列的方法取得序列。首先我们将鼠标移至序列文本文件上方按下鼠标右键后,点选开启:

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A.7 得到的两个附档名为seq及abI的档案

接着点选从清单对话盒中选取要开启的程序(A.8):可以选择用记事本(Notepad)或是用文本编辑器(WordPad)开启:

如此一来我们就可以顺利的取得序列,接下来就可以将此序列汇入欲分析的软件内进行分析。

A.8 可以用记事本(Notepad)开启

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NOTE:用记事本开启的档案可能会出现乱码(如下图所示),这是因为字型格式不同或是句柄所引起,我们只要调整字型格式就可以修正乱码(图A.9)。在此推荐使用WordPad开启档案,将会减少乱码出现的机会。

A.9 可利用WordPad,或其他可开FASTA格式的程序开启

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