1、薄层色谱(TLC):首先选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开。一般使用通用型显色剂,并根据可能存在的杂质选择专属显色剂。
2、熔点测定:通过测量熔程来判断纯度。纯化合物的熔点短,通常在1至2度范围内。混合物的熔点下降,熔程变长。
3、高效液相色谱(HPLC):由于常用的系统较少且分离效果好,通常不需选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,但需要三种不同极性的溶剂系统以使目标峰在不同保留时间出峰。
4、软电离质谱:这种质谱技术只提供化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。
5、核磁共振(NMR):如果在氢谱中发现许多积分不到一的小峰,可能是样品中的杂质。利用门控去偶技术,通过对碳谱的定量分析,也能鉴定纯度。